一場(chǎng)疫情，讓我們對(duì)生物安全有了更多認(rèn)識(shí)和更深刻理解，實(shí)驗(yàn)室生物安全也越來(lái)越被人們所重視。習(xí)近平總書(shū)記在中共中央政治局就加強(qiáng)我國(guó)生物安全建設(shè)第三十三次集體學(xué)習(xí)中指出，要加強(qiáng)對(duì)國(guó)內(nèi)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全的管理，嚴(yán)格執(zhí)行有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，嚴(yán)格管理實(shí)驗(yàn)樣本、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)廢棄物。

生物安全實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行生物安全操作的主要陣地，生物安全柜是生物安全實(shí)驗(yàn)中的重要裝備。我們就大家比較關(guān)心的醫(yī)療機(jī)構(gòu)生物安全，特別是生物安全柜的相關(guān)知識(shí)進(jìn)行了梳理，上期重點(diǎn)分享了生物安全柜、加強(qiáng)型生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室等相關(guān)定義和病原微生物分類、生物安全實(shí)驗(yàn)室防護(hù)水平分級(jí)、生物安全柜分類等。本期重點(diǎn)分享生物安全柜的管理。

一、日常使用生物安全柜時(shí)的注意事項(xiàng)

1. 生物安全柜的垂直可移動(dòng)窗開(kāi)啟與關(guān)閉應(yīng)輕便，在行程范圍內(nèi)的任何位置不產(chǎn)生卡死現(xiàn)象，不應(yīng)有明顯的左右或前后晃動(dòng)現(xiàn)象，滑動(dòng)應(yīng)順暢。開(kāi)關(guān)、按鍵的操作應(yīng)靈活可靠，零部件應(yīng)緊固無(wú)松動(dòng)，指示正確。

2. 工作前預(yù)先放好實(shí)驗(yàn)材料、只放入實(shí)驗(yàn)必需的實(shí)驗(yàn)材料和物品，防止生物安全柜過(guò)載。可高壓滅菌的收集生物危害性實(shí)驗(yàn)廢棄物的容器、消毒劑及配套的消毒工具也應(yīng)放人安全柜內(nèi)，以避免操作者的手臂在玻璃懸窗進(jìn)口處快速移動(dòng)或頻繁進(jìn)出干擾安全柜內(nèi)的氣流，降低了對(duì)檢驗(yàn)人員和物品的防護(hù)。

3. 實(shí)驗(yàn)材料和物品應(yīng)按照從清潔區(qū)、半污染區(qū)到污染區(qū)的方向順序擺放，三個(gè)區(qū)域之間應(yīng)無(wú)交叉，操作過(guò)程中應(yīng)方便拿取，以避免交叉污染。

4. 放置到生物安全柜內(nèi)的實(shí)驗(yàn)用材料和物品應(yīng)用70%的酒精或其他中性消毒劑擦拭表面清除污染，以避免污染的物品放人生物安全柜。

5. 可能產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備，如混勻器、離心機(jī)等應(yīng)放置在生物安全柜的后部，離心機(jī)不得被放置在I級(jí)和Ⅱ級(jí)生物安全柜內(nèi)。

6. 實(shí)驗(yàn)材料和物品應(yīng)盡可能的放置在靠近生物安全柜工作臺(tái)面后邊緣且不遮擋前部、后部和側(cè)部進(jìn)氣格柵的位置。體積較大的實(shí)驗(yàn)材料和物品，如盛放吸管的盤子、抽濾瓶等彼此間應(yīng)留有距離，并放在生物安全柜內(nèi)的一側(cè)避免在實(shí)驗(yàn)期間移動(dòng)。不阻斷前后空氣格柵、減少干擾氣流。避免使用干擾生物安全柜內(nèi)氣流流動(dòng)的設(shè)備和實(shí)驗(yàn)步驟

7. 操作人員的雙臂以垂直方向緩慢伸入生物安全柜內(nèi)，至少等待1min使生物安全柜內(nèi)的氣流穩(wěn)定后再進(jìn)行操作，以避免干擾安全柜內(nèi)的氣流流動(dòng)。

8. 在工作區(qū)域工作、生物安全柜處于正常工作狀態(tài)時(shí)，不應(yīng)有明顯的機(jī)震聲。

9. 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)使用恰當(dāng)?shù)牟僮鞣椒ūM量減少濺灑或者氣溶膠的產(chǎn)生，如有溢出及時(shí)清潔和消毒溢出。

10. 最好用一次性接種環(huán)、電加熱器滅菌接種環(huán)。

11. 實(shí)驗(yàn)完畢具有潛在生物危害的實(shí)驗(yàn)材料和物品應(yīng)消除表面污染，使用可滅菌的廢棄物處理袋封裝后移出生物安全柜，放入高壓滅菌鍋或其他滅菌裝置滅菌處理。

12. 不宜在生物安全柜內(nèi)使用明火，明火易造成氣流動(dòng)蕩，破壞高效過(guò)濾（HEPA）起源吹向臺(tái)面的模式。

13. 在關(guān)閉安全柜前應(yīng)繼續(xù)運(yùn)行至少5分鐘。

14. 按照使用說(shuō)明書(shū)指導(dǎo)正確使用和維修。

二、清潔消毒

1. 工作前的自凈和消毒

   A.在工作前要讓生物安全柜的風(fēng)機(jī)至少運(yùn)行3-5分鐘，使柜內(nèi)的空氣實(shí)現(xiàn)自凈。

   B.安全柜的工作臺(tái)面、內(nèi)壁（不包括送風(fēng)濾器擴(kuò)散板）和觀察窗的內(nèi)表面使用70%酒精或其他中性消毒劑擦拭。消毒后再用無(wú)菌水或蒸餾水進(jìn)行擦拭以清除殘余消毒劑。

   C.放到安全柜的容器和材料的表面使用70%乙醇擦拭，以減少將環(huán)境的污染物帶到安全柜內(nèi)。

   D.定期對(duì)孵箱和冰箱進(jìn)行消毒。

2. 工作結(jié)束時(shí)的表面消毒

   工作完成時(shí)，應(yīng)對(duì)所有的容器和設(shè)備進(jìn)行表面消毒并拿出安全柜。每天工作結(jié)束時(shí)，對(duì)安全柜進(jìn)行最后的表面消毒，包括工作臺(tái)面、安全柜的邊壁、后壁、玻璃懸窗內(nèi)外側(cè)、紫外線燈管和電源輸出口以及包括試驗(yàn)設(shè)備在內(nèi)的所有物品。消毒劑可選擇70%酒精或其他中性消毒劑。

在進(jìn)行安全柜內(nèi)部消毒時(shí)，操作人員除了手臂以外的 任何部位不得進(jìn)入生物安全柜內(nèi)。

三、應(yīng)急處置

1. 一般要求

   A.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，應(yīng)開(kāi)啟風(fēng)機(jī)和氣流指示器(如果有)等，確認(rèn)生物安全柜均處于“安全”狀態(tài)，如有任何故障應(yīng)立即停止工作，并報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主任。

   B.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，操作人員應(yīng)提前準(zhǔn)備好所用應(yīng)急物品，如危害物溢出應(yīng)急處置物品，適宜消毒劑、毛巾、紙巾和可滅菌的廢棄物處理袋等，放在隨時(shí)拿到投人使用的位置。

   C.生物安全柜運(yùn)行時(shí)，發(fā)生任何氣流異常等報(bào)警，應(yīng)立即停止工作，立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主任。

2. 溢出物應(yīng)急處置

   （1）發(fā)生少量噴灑時(shí)的清潔消毒

   在生物安全柜內(nèi)發(fā)生少量(體積小于1ml)的噴灑時(shí)，立即用吸水紙巾進(jìn)行處理，將使用過(guò)的紙巾放到生物危害包里。并根據(jù)污染物的類型選擇適宜的消毒劑擦洗臺(tái)面及內(nèi)部所有可能受污染的物品。

   （2）發(fā)生大量溢出或容器破碎時(shí)的清潔消毒

   a)在生物安全柜保持運(yùn)行狀態(tài)，等待至少5min;

   b)如操作人員的手套或防護(hù)服已經(jīng)被污染，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)對(duì)手套消毒后，脫下手套，帶上新手套后脫掉所污染的防護(hù)服，用適當(dāng)?shù)南緞┣逑幢┞恫课唬?/span>

   c)操作人員穿防護(hù)服、戴手套和眼罩，先用吸水紙巾吸收溢出物，再用浸有消毒劑的毛巾來(lái)覆蓋溢出物，作用一段時(shí)間把氣溶膠的產(chǎn)生控制到最小化；

   d)對(duì)于溢出中等或高風(fēng)險(xiǎn)的物質(zhì)，在確保排水閥關(guān)閉后，用消毒劑浸泡工作臺(tái)面和排水溝，讓液體通過(guò)格柵流到集水槽上，收集廢液后再?gòu)氐浊逑醇邸．?dāng)有危險(xiǎn)等級(jí)為2和3的高風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)溢出，需由有資質(zhì)的人員使用甲醛熏蒸法來(lái)消毒生物安全柜；

   e)覆蓋溢出物的毛巾、所有柜內(nèi)操作過(guò)的物品和被污染的實(shí)驗(yàn)材料都應(yīng)使用可滅菌的廢棄物處理袋封裝后移出安全柜，高壓滅菌或采用其它有效的滅菌方法進(jìn)行處理，不適用高壓滅菌應(yīng)用消毒滅菌劑擦拭至少20min徹底清除表面污染；破碎的玻璃或其他銳器要用鑷子或鉗子處理；

   f)用消毒劑擦拭生物安全柜內(nèi)壁、工作表面以及玻璃懸窗內(nèi)側(cè)，作用一定時(shí)間后，用潔凈水擦干凈消毒劑殘留；

   g)處理完畢操作人員應(yīng)更換污染的防護(hù)服及手套，封裝后按照實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢物進(jìn)行處理，并用肥皂和清水清洗手和暴露的皮膚；

   h)全部步驟結(jié)束后生物安全柜應(yīng)繼續(xù)運(yùn)行2min~3min以清除工作區(qū)域內(nèi)浮塵污染；

   i)再次使用前生物安全柜應(yīng)至少運(yùn)行15min再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。

   （3）如果溢灑物流人生物安全柜內(nèi)部或需要浸泡集水槽，在清理前應(yīng)報(bào)告設(shè)備管理員，需要評(píng)估后再采取適當(dāng)?shù)拇胧?/span>

四、日常維護(hù)

1. 定期清潔操作臺(tái)面和前窗玻璃；

2. 保持室內(nèi)空氣質(zhì)量,延長(zhǎng)高效過(guò)濾器使用壽命；

3. 定期檢測(cè)紫外燈的照射強(qiáng)度,及時(shí)更換燈管；

4. 長(zhǎng)期不用應(yīng)定期進(jìn)行維護(hù)性運(yùn)行；

5. 高效過(guò)濾器應(yīng)定期檢測(cè)，及時(shí)更換；

6. 做好使用和維護(hù)記錄。

五、生物安全柜的檢測(cè)要求

1. 根據(jù)WS 233-2002《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》的相關(guān)規(guī)定，有下列情況之一時(shí)，必須對(duì)生物安全柜進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)：

   （1）生物安全實(shí)驗(yàn)室竣工后，投入使用前，生物安全柜已安裝完畢；

   （2）生物安全柜被移動(dòng)位置后。

   （3）生物安全柜進(jìn)行檢修后。

   （4）生物安全柜更換高效過(guò)濾器后。

   （5）生物安全柜一年一度的常規(guī)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)

2. 依據(jù)SNT3901-2014《生物安全柜使用和管理規(guī)范》，在生物安全柜的檢定周期內(nèi)應(yīng)至少開(kāi)展1次生物安全柜的期間核查，實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)生物安全柜的使用頻次和實(shí)驗(yàn)室所開(kāi)展的檢測(cè)工作的危害程度增加期間核查次數(shù)。期間核查的內(nèi)容至少應(yīng)包括垂直氣流平均風(fēng)速、工作窗口氣流流向、潔凈度。

小結(jié)

生物安全柜在實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)上有著重要的作用，只有規(guī)范其使用管理，才能充分發(fā)揮生物安全柜的防護(hù)性能，規(guī)避感染風(fēng)險(xiǎn)，實(shí)現(xiàn)真正意義上的實(shí)驗(yàn)室生物安全。

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